溫敏突變株在發(fā)酵工業(yè)中的應(yīng)用

①溫敏突變株在發(fā)酵的應(yīng)用 發(fā)酵中增加產(chǎn)量的關(guān)鍵，決定于細(xì)胞膜的滲透性。選育細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)或功能缺損的溫敏突變株，可以通過(guò)調(diào)節(jié)溫度來(lái)控制細(xì)胞瞠的滲透性，促使大量外泄。

②溫敏突變株在發(fā)酵中的應(yīng)用 以cl化合物為*碳源的微生物，合成細(xì)胞組分是通過(guò)途徑來(lái)實(shí)現(xiàn)的。可以看出，要提高產(chǎn)量關(guān)鍵在于阻斷降解途徑。在過(guò)程中曾采用一些抑制劑，提高了的轉(zhuǎn)化率，即當(dāng)產(chǎn)生菌生長(zhǎng)到一定階段，加入8一羥基喹啉、2．2一聯(lián)吡啶、CO 2+或Ni 2+等，以抑制殘余的降解活力。但這種外加藥物的方法用于工業(yè)并不是理想方法。選育降解酶溫敏突變株，在許可溫度下，產(chǎn)生菌具有正常的降解活力，能利用甲醇生長(zhǎng)繁殖。當(dāng)溫度上升到非許可范圍時(shí)，產(chǎn)生菌失去降解作用，因而能大量分泌。

(3)溫敏突變株在微生物單細(xì)胞蛋白中的應(yīng)用 單細(xì)胞蛋白的菌種，除含有高蛋白質(zhì)特性外，還要具有兩個(gè)特點(diǎn)：①生長(zhǎng)迅毫．底物利用率高；②菌體細(xì)胞壁易破碎、容易自溶，且細(xì)胞易于沉降，便于分離純化．有益于動(dòng)物消化利用。

    對(duì)于單細(xì)胞蛋白的菌種，現(xiàn)已篩選到一些具有特色的溫度敏感突變株。例如DNA復(fù)制缺損的TS突變株，在許可溫度下培養(yǎng)時(shí)菌體形態(tài)和生長(zhǎng)都正常，但當(dāng)溫度上升到非許可溫度培養(yǎng)時(shí)，細(xì)胞形態(tài)開(kāi)始發(fā)生變化。細(xì)胞伸長(zhǎng)，從母細(xì)胞上長(zhǎng)出的芽也變長(zhǎng)，且不脫落．繼續(xù)培養(yǎng)，細(xì)胞和芽凝聚成叢狀，易于凝集沉降。又如易于自溶的TS突變株，在許可溫度下培養(yǎng)時(shí)，生長(zhǎng)正常。當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)繁殖達(dá)到zui大量時(shí)，調(diào)節(jié)溫度到非許可狀態(tài)，繼續(xù)培養(yǎng)．菌體細(xì)胞發(fā)生自溶，此時(shí)釋放到細(xì)胞外的蛋白質(zhì)含量占細(xì)胞總蛋白質(zhì)的30％，而親株僅2％。另外，篩選蛋氨酸含量高的TS突變株，能提高單細(xì)胞蛋白的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。

    TS突變株用于工業(yè)發(fā)酵的前景十分誘人。例如篩選三羧酸循環(huán)缺陷溫敏突變株，透過(guò)溫度控制阻斷三羧酸循環(huán)，提高檸檬酸等有機(jī)酸產(chǎn)量。

    篩選合成代謝酶缺失的溫敏突變株對(duì)發(fā)酵工業(yè)特別有利。這種溫敏突變株在許可溫度下培養(yǎng)時(shí)酶活力正常．不需要添加生長(zhǎng)因子。當(dāng)菌體生長(zhǎng)到一定階段，將溫度升高到非許可條件下，此時(shí)合成代謝酶活力下降或*消失，不能合成終產(chǎn)物，使反饋調(diào)節(jié)被解除，因此中間產(chǎn)物能不斷地被合成和積累。細(xì)胞