植物Elisa試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)，往預(yù)先包被植物磷脂酸捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過(guò)溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的植物磷脂酸呈正相關(guān)，用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度，計(jì)算樣品濃度。

　　嚴(yán)格按照規(guī)定的時(shí)間和溫度進(jìn)行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。

　　使用植物Elisa試劑盒時(shí)要注意以下事項(xiàng)。

　　消除板底殘留的液體和手指印，否則影響OD值。

　　洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過(guò)程中不要讓微孔干燥掉。

　　底物顯色液應(yīng)呈無(wú)色或很淺的顏色，已經(jīng)變藍(lán)的底物液不能使用。

　　在儲(chǔ)存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射。

　　避免試劑和標(biāo)本的交叉污染以免造成錯(cuò)誤結(jié)果。

　　平衡至室溫后再打開(kāi)密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。

　　任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強(qiáng)烈氣體。任何漂白成分都會(huì)破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性。

　　試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡5-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

　　濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果，各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間好控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，使用排槍加樣。

　　請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，好做復(fù)孔，如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高，樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔孔的OD值，請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)后乘以總稀釋倍數(shù)。

　　封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

　　嚴(yán)格按照說(shuō)明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。

　　所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。