進口ELISA試劑盒操作過程的控制：①嚴格按照試劑說明操作。操作前將試劑在室溫下平衡30～60 min。②加樣后及時放入孵箱。標本較多時，要分批操作。防止孵育時間人為延長，導致非特異性結合緊附于反應孔周圍，難以清洗*。③封板溫育時，各孔一定要封嚴，ELISA試劑盒防止陽性標本的液體蒸發，產生周邊現象從而導致“盎”灞的出現。④用洗板機洗板時，保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干；還要防止針口有纖維蛋白或異物，這些異物在洗板的過程中易產生拖帶現象。⑤合理安排檢測量，以免反應板過多造成洗板等待時間長。⑥加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。⑦顯色劑盡量在臨用前配制，不使用過期顯色劑，肉眼可見淺藍的TM顯色劑不用。⑧加樣時保持顯色劑不外流；A、B液應避免接觸金屬器械。加終止液時要避免產生氣泡。⑨應保證酶標板清潔，整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸。以上的措施可以得到更準確、更可靠的實驗結果。加樣吸嘴的潔凈與否和吸量的準確性直接影響檢測結果。
由于吸嘴構造特殊，導致清洗困難，加大了交叉污染的機會。建議用一次性吸嘴。進口ELISA試劑盒加樣器也要經常清洗，定期校準。加樣時應將所加物加在ELISA試劑盒板孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可濺出。
溫浴影響。在建立ELISA試劑盒方法時做反應動力學研究。實驗表明，兩次抗原抗體反應一般在37℃經～2 h，產物的生成可達。為避免蒸發，板上應加蓋，也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋板孔。反應板孔、反應板不宜疊放，以保證各板的溫度都能迅速平衡。溫育的溫度和時間應嚴格按規定控制，特別要注意邊緣位置。96孔酶標板結構特別，易產生邊緣效應，抗原抗體結合及酶促反應對溫度有嚴格要求，酶標板周邊孔與內部孔升降溫速率不同，造成周邊與內部孔結果差異；干浴與水浴存在明顯的差異，盡可能使用水浴，并要求固相板放入水中，減少受熱不均，貼密封膜，進口ELISA試劑盒防止污物浸入。
