標(biāo)本在保存中如呈現(xiàn)細(xì)菌污染所造成的的混濁或絮狀物時,應(yīng)離心沉積后取上清檢測。Elisa試驗是一種敏感性高,特異性強,重復(fù)性好的試驗確診辦法。因為其試劑安穩(wěn)、易保存,操作簡便,成果判斷較客觀等要素,已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)查驗的各領(lǐng)域中。
冰凍保存的血清標(biāo)本須留意防止因停電等形成的重復(fù)凍融,
兔ELISA試劑盒的重復(fù)凍融所發(fā)生的機械剪切力將對標(biāo)本中的蛋白等分子發(fā)生損壞作用,然后引起假陰性成果。此外,凍融標(biāo)本的混勻亦應(yīng)留意,不要進(jìn)行劇烈振動,重復(fù)倒置混勻即可。
血清標(biāo)本如是以無菌操作分離,則能夠在2~8℃下保存一周,ELISA試劑盒如為有菌操作,則主張冰凍保存。樣本的保存,應(yīng)在-70℃以下。
要留意防止呈現(xiàn)嚴(yán)峻溶血,血紅蛋白中含有血紅素基團,其有相似過氧化物的活性,因而,在以HRP為符號酶的試劑盒測定中,如血清標(biāo)本中血紅蛋白濃度較高,則其就很簡單在溫育進(jìn)程中吸附于固相,然后與后邊參加的HRP底物反響顯色。
樣本的收集及血清分離中要留意盡量防止細(xì)菌污染,一則細(xì)菌的成長,其所排泄的一些酶或許會對抗原抗體等蛋白發(fā)生分化作用;二則一些細(xì)菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶自身會對用相應(yīng)酶作符號的測定辦法發(fā)生非特異性攪擾。
針對不同酶標(biāo)板注意調(diào)整吸液頭下降高度,避免沖洗針頭卡住酶標(biāo)板;
注意調(diào)整洗液量,洗液量過多將溢出,過少將達(dá)不到洗滌效果;
需每天校正注液量及殘液量,洗滌后殘液量不得大于2μl;
及時更換破損吸液針,避免破壞底板包被;
嚴(yán)禁將不匹配的其他洗液使用在兔ELISA試劑盒中;
關(guān)機前使用蒸餾水沖洗管道,避免洗液的結(jié)晶物堵塞管道。