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22RV(前列腺癌細(xì)胞) 具體操作
取出凍存管: 根據(jù)細(xì)胞凍存記錄按標(biāo)簽找到所需細(xì)胞的編號(hào)。
從液氮罐中取出細(xì)胞盒,取出所需的細(xì)胞,同時(shí)核對(duì)管外的編號(hào)。
初學(xué)者易犯錯(cuò)誤:水浴鍋未預(yù)熱或者未預(yù)熱到37℃。
水浴鍋內(nèi)凍存管太多,導(dǎo)致傳熱不佳,使融化時(shí)間延長(zhǎng)。
離心前忘記平衡,導(dǎo)致離心機(jī)損壞和細(xì)胞丟失。
一次復(fù)蘇細(xì)胞過(guò)多,忘記更換吸頭和吸管,導(dǎo)致細(xì)胞交叉污染。
實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:將水浴鍋預(yù)熱至37℃
22RV(前列腺癌細(xì)胞)用75%酒精擦拭紫外線照射30min的超凈工作臺(tái)臺(tái)面。
在超凈工作臺(tái)中按次序擺放好消過(guò)毒的離心管、吸管、培養(yǎng)瓶 等。
迅速解凍:
迅速將凍存管投入到已經(jīng)預(yù)熱的水浴鍋中迅速解凍,并要不斷的搖動(dòng),使管中的液體迅速融化。
.約-2min后
凍存管內(nèi)液體*溶解,取出用酒精棉球擦拭凍存管的外壁,再拿入超凈臺(tái)內(nèi)。
平衡離心:用架盤(pán)天平平衡后,放入離心機(jī)中3000r/min 離心3min
制備細(xì)胞懸液:吸棄上清液。
向離心管內(nèi)加入0ml培養(yǎng)液,吹打制成細(xì)胞懸液。
活化與細(xì)胞復(fù)蘇 收到細(xì)胞株包裹時(shí), 請(qǐng)檢查細(xì)胞株冷凍管是否有解凍情形, 若有請(qǐng)立即通知。細(xì)胞株請(qǐng)盡速開(kāi)始培養(yǎng), 或立即冷凍保存(置于–70 °C, 隔夜后, 移到liq N2)。
細(xì)胞復(fù)蘇的原則-快速融化:必須將凍存在-96℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃,使細(xì)胞外凍存時(shí)的冰晶迅速融化,避免冰晶緩慢融化時(shí)進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶,對(duì)細(xì)胞造成損害。
細(xì)胞計(jì)數(shù):細(xì)胞濃度以5×05/ml為宜。
培養(yǎng)細(xì)胞將復(fù)合細(xì)胞計(jì)數(shù)要求的細(xì)胞懸液分裝入培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),將培養(yǎng)瓶放入37℃和5%CO2的培養(yǎng)箱內(nèi)2-4小時(shí)(或者24-48小時(shí))后換液繼續(xù)培養(yǎng)培養(yǎng),換液的時(shí)間由細(xì)胞情況而定。
公司其他銷(xiāo)量大產(chǎn)品信息:604 LST‐MUG 肉湯 SN 00g/瓶 用于大腸桿菌熒光檢測(cè)
04 Columbia‐MUG 瓊脂培養(yǎng)基 SN 00g/瓶 用于大腸桿菌熒光檢測(cè)沙門(mén)氏菌、志賀氏菌
030 緩沖蛋白胨水(BPW) GB、SN 50g/瓶 用于沙門(mén)氏菌前增菌
0307 三糖鐵(TSI)瓊脂 GB、SN 50g/瓶 用于細(xì)菌生化試驗(yàn)
030 四硫磺酸鈉煌綠(TTB)增菌液基礎(chǔ)GB、SN 50g/瓶 用于沙門(mén)氏菌選擇性增菌
035 四硫磺酸鈉煌綠(TTB)增菌液基礎(chǔ)添加劑 種×0 支/盒取碘溶液、0.%煌綠水溶液各支用于00ml030 中
0306 木糖賴(lài)氨酸脫氧膽鹽(XLD)瓊脂 GB、SN 50g/瓶 用于腸道菌選擇性分離
0303 亞酸鹽(SC)增菌液 GB、SN 50g/瓶 用于沙門(mén)氏菌選擇性增菌
0304 亞硫酸鉍(BS)瓊脂 GB、SN 50g/瓶 用于沙門(mén)氏菌選擇性分離
0305 HE 瓊脂 GB 50g/瓶 用于腸道菌選擇性分離
039 氯化鎂孔雀綠增菌液(MM) 50g/瓶 用于沙門(mén)氏菌選擇性增菌
033 膽鹽硫乳瓊脂培養(yǎng)基(DHL) 藥典、SN 50g/瓶 用于腸道菌選擇性分離
030 亞利桑那菌瓊脂 SN 50g/瓶 用于亞利桑那菌的分離
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